REGISTRO DOI: 10.69849/revistaft/th10249131203
Quele Pires Cavalaris1
Joao Vitor Matias De Souza1
Soraya Ricardo Oliveira1
Kelly Lima Gomes1
RESUMO
As técnicas utilizadas em processos com amostras de mama contribuem com várias áreas da medicina, incluindo o diagnóstico do câncer de mama, estudos em biologia molecular e investigação de doenças metabólicas. A coleta e o manuseio apropriado de amostras desses tipos são essenciais para garantir resultados precisos e confiáveis. Para a mama, amostras comuns incluem biópsias e mastectomias. Posteriormente, os espécimes são processados e preparados para análise histológica, imuno-histoquímica e molecular. Isso requer a fixação dos tecidos em formalina, inclusão em parafina e secções deles para exame microscópico. Com base nessas informações, nesta revisão serão abordadas as técnicas utilizadas na análise de amostras de tecidos mamários, que são necessárias para se entender aspectos cruciais da saúde humana, especialmente os vinculados ao câncer da mama. Além disso, o texto examina cada fase do teste: as condições de coleta, o momento exato de preparo, métodos funcionam tanto com material doméstico como patológico.
Palavras-chave: Biologia molecular, doenças patológicas, câncer de mama.
ABSTRACT
The techniques used in processes involving breast tissue samples contribute to various areas of medicine, including breast cancer diagnosis, studies in molecular biology, and investigation of metabolic diseases. Proper collection and handling of samples of these types are essential to ensure accurate and reliable results. For the breast, common samples include biopsies and mastectomies. Subsequently, specimens are processed and prepared for histological, immunohistochemical, and molecular analysis. This requires tissue fixation in formalin, embedding in paraffin, and sectioning for microscopic examination. Based on this information, this review will address the techniques used in the analysis of breast tissue samples, which are necessary to understand crucial aspects of human health, especially those linked to breast cancer. Additionally, the text examines each stage of the test: collection conditions, the exact timing of preparation, methods that work with both household and pathological material.
Keywords: Molecular biology, pathological diseases, breast cancer.
INTRODUÇÃO
A detecção precoce do câncer de mama é cada vez mais frequente, graças aos programas de rastreio e à conscientização da população sobre a importância da prevenção. Com isso, um número crescente de mulheres estão procurando avaliação de anomalias mamárias detectadas, mesmo que não haja sintomas evidentes da doença (CANTINELLI et al.; 2006). Além disso, o avanço das tecnologias diagnósticas e terapêuticas tem permitido que mais mulheres com câncer de mama vivam com as consequências do tratamento, com melhor qualidade de vida e sobrevida prolongada (HOLLOWAY et al., 2010).
A histopatologia desempenha um papel crucial nessa jornada, pois é o método diagnóstico mais confiável para a detecção e caracterização do câncer de mama (RASHMI R; PRASAD K; UDUPA CBK, 2021). A análise microscópica de amostras de tecido mamário permite a identificação de alterações celulares e teciduais que são características do câncer, além de fornecer informações importantes sobre o tipo, grau e extensão da doença. Essas informações são fundamentais para a escolha do tratamento mais adequado para cada paciente, o que pode incluir cirurgia, radioterapia, quimioterapia ou terapia hormonal.
No entanto, a preparação de amostras para a análise histológica requer métodos e processos específicos, tendo em vista as particularidades do material biológico, tais como músculo, pele e gordura (GURCAN et al., 2009). O processamento histológico é composto por etapas que envolvem a análise macroscópica, a clivagem e o processamento tecidual, o que é crucial para a obtenção de resultados precisos e confiáveis. Entre os desafios encontrados no processamento de amostras mamárias, destaca-se a presença de tecido adiposo, que pode apresentar dificuldades técnicas e interferir na qualidade das análises histológicas (MALINIAK et al., 2020) . Nesse contexto, é fundamental desenvolver e aprimorar métodos e processos específicos para o processamento de peças gordurosas, visando minimizar essas dificuldades e garantir a confiabilidade dos resultados. No ambiente hospitalar, o processo de preparação das amostras para análise histológica segue protocolos específicos, que podem variar em relação aos agentes químicos e tempos de exposição utilizados. Testar e otimizar esses protocolos é fundamental para garantir a eficiência e a qualidade do processo de análise histológica, contribuindo para um diagnóstico preciso e uma abordagem terapêutica adequada.
Além disso, a melhoria das tecnologias diagnósticas e terapêuticas tem permitido a individualização da avaliação diagnóstica e do tratamento do câncer de mama, levando a uma maior eficácia e a uma redução da morbidade associada ao tratamento. A combinação de métodos diagnósticos precisos e confiáveis, como a histopatologia, com tratamentos personalizados e minimamente invasivos, tem contribuído para uma melhor qualidade de vida e sobrevida prolongada para as mulheres com câncer de mama (HOLLOWAY, 2010).
Sendo assim, o câncer de mama é uma doença complexa que requer uma abordagem multidisciplinar, envolvendo a detecção precoce, a avaliação diagnóstica precisa, o tratamento individualizado e o acompanhamento a longo prazo. Devido a isso, a histopatologia desempenha um papel crucial nessa jornada, fornecendo informações essenciais para o diagnóstico e o tratamento do câncer de mama. No entanto, é fundamental continuar a investir em pesquisas e tecnologias que possam aprimorar a precisão e a eficácia dos métodos diagnósticos e terapêuticos, visando melhorar a qualidade de vida e a sobrevida das mulheres com câncer de mama (BHUSHAN; GONSALVES; MENON JU, 2021).
Nesse sentido, o objetivo do trabalho é otimizar o processo de preparação de amostras mamárias para diagnósticos. Uma análise será realizada para identificar técnicas de preparação que garantam a preservação das características morfológicas e bioquímicas da amostra, com o objetivo de aumentar a precisão e a confiabilidade dos resultados de diagnóstico. Além disso, a busca investigará os fatores pré-analíticos que podem influenciar o processo de preparação de amostras mamárias, como o tempo de fixação, o tipo de fixador usado e os métodos de armazenamento. O intuito é investigar como esses fatores interferem na qualidade das amostras e, consequentemente, na interpretação dos resultados diagnósticos. Através dessa pesquisa, espera-se contribuir para a melhoria da qualidade dos diagnósticos de câncer de mama, garantindo a preservação das características morfológicas e bioquímicas das amostras mamárias e minimizando a influência dos fatores pré-analíticos no processo de preparação. Isso pode levar a uma maior precisão e confiabilidade dos resultados diagnósticos, contribuindo para uma melhor tomada de decisão terapêutica e, consequentemente, para uma melhor qualidade de vida e sobrevida das mulheres com câncer de mama.
MATERIAL E MÉTODOS
Os passos empregados no processamento técnico de amostras mamárias e tecidos gordurosos inicia-se com a determinação dos parâmetros iniciais do processo. Em primeiro lugar, as amostras serão submetidas a um protocolo de fixação utilizando formol a 10% por uma duração de 2 horas. Este reagente tem um papel crucial na coagulação das proteínas e na preservação da morfologia celular. Após a fixação, as amostras serão, gradualmente, desidratadas através de banhos em soluções alcoólicas. O tecido estará imerso em álcool etílico a 70% por 2 horas, seguido de álcool etílico a 80% por mais 2 horas.
Em seguida, as amostras serão desidratadas completamente com álcool etílico a 99% ou absoluto, por um período de três horas. Este processo tem como objetivo remover a água do tecido de forma gradual, preparando-o para as próximas etapas. Após a desidratação, as amostras serão clareadas e desparafinadas com um banho de xilol por 2 horas. O xilol tem a capacidade de remover o excesso de álcool e clarear o tecido, tornando-o transparente e pronto para a inclusão de parafina. As amostras serão, então, mergulhadas em parafina fundida por 2 horas, formando blocos sólidos que serão usados para a microtomia. O processamento completo das amostras é composto por 13 horas.
É importante ressaltar que, durante todo o processo, é necessário manter a temperatura e a umidade controladas, além de seguir rigorosamente os protocolos estabelecidos para cada etapa. Além disso, é fundamental utilizar materiais de alta qualidade e em conformidade com as normas de segurança e saúde. Após a realização do primeiro experimento, serão realizadas análises preliminares para avaliar a qualidade dos cortes. Diante dessas análises, serão necessárias alterações no protocolo para melhorar a qualidade das amostras. O processo será repetido, com a repetição das etapas de coleta, processamento e análise, além de realizar alterações incrementais no protocolo a cada iteração. O tempo de processamento será gradualmente aumentado até atingir o objetivo final de obtenção de cortes perfeitos para análise histológica. Para a análise do tecido adiposo, é necessário utilizar técnicas específicas de processamento e análise, como a citometria de fluxo e a análise de expressão gênica. Essas técnicas permitem a análise detalhada do tecido adiposo e a identificação de alterações moleculares que podem estar relacionadas ao câncer de mama.
RESULTADOS E DISCUSSÃO ESPERADOS
Com base nos dados disponíveis, espera-se que os resultados deste estudo sobre o processamento técnico de amostras de mama incluam o desenvolvimento de protocolos otimizados para processamento de amostras, identificação e avaliação de fatores pré-analíticos que afetam a preparação, dissecção histológica precisa e registro detalhado. esperado. Para dessa formar contribuir para melhorar a qualidade do diagnóstico do câncer de mama em todas as etapas do processo. Sendo que esses resultados podem proporcionar melhores decisões de tratamento, resultando em melhor qualidade de vida e sobrevivência para as mulheres afetadas por esta doença.
CONSIDERAÇÕES FINAIS
Este estudo destaca a importância do desenvolvimento de protocolos otimizados para processamento técnico de amostras de mama para preservar propriedades morfológicas e bioquímicas. Para garantir a precisão e confiabilidade dos resultados diagnósticos, é importante identificar e avaliar os fatores pré-analíticos que influenciam esse processo. Além disso, para melhorar a qualidade do diagnóstico do câncer de mama, é importante obter cortes histológicos completos e obter registros detalhados de todas as etapas do processo. Espera-se que minimizar a interferência desses fatores préanalíticos contribua significativamente para melhores decisões de tratamento e, em última análise, melhore a qualidade de vida e a sobrevida dos pacientes com esta doença.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
BHUSHAN A, GONSALVES A, MENON JU. Current State of Breast Cancer Diagnosis, Treatment, and Theranostics. Pharmaceutics. 2021 May 14;13(5):723. DOI: 10.3390/pharmaceutics13050723. PMID: 34069059; PMCID: PMC8156889.
GURCAN MN, BOUCHERON LE, CAN A, MADABHUSHI A, RAJPOOT NM,YENER B. Histopathological image analysis: a review. IEEE Rev Biomed Eng. 2009;2:147-71. DOI: 10.1109/RBME.2009.2034865. EPUB 2009 Oct 30. PMID: 20671804; PMCID: PMC2910932.
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MALINIAK ML, CHERIYAN AM, SHERMAN ME, LIU Y, GOGINENI K, LIU J, HE J, KRISHNAMURTI U, MILLER-KLEINHENZ J, ASHIQUEALI R, HE J, YACOUB R, MCCULLOUGH LE. Detection of crown-like structures in breast adipose tissue and clinical outcomes among African-American and White women with breast cancer. Breast Cancer Res. 2020 Jun 17;22(1):65. DOI: 10.1186/s13058-020-01308-4. PMID: 32552729; PMCID: PMC7298873.
RASHMI R, PRASAD K, UDUPA CBK. Breast histopathological image analysis using image processing techniques for diagnostic purposes: A methodological review. J Med Syst. 2021 Dec 3;46(1):7. DOI: 10.1007/s10916-021-01786-9.PMID: 34860316; PMCID: PMC8642363.
1 Faculdade da Amazônia – UNAMA Porto Velho