Helicobacter pylori: SYSTEMATIC REVIEW ON CLINICAL-LABORATORY DIAGNOSTICO
REGISTRO DOI:10.5281/zenodo.10223488
Felipe Falcão Moreira1
Filipe Jesus Macedo Nascimento1
Neuziane Oliveira De Souza1
Vitória Tavares Farias1
Profa. Dra. Anne Cristine Gomes De Almeida2
Coorientadora Profa. Msc. Amanda Bezerra Carvalho3
AGRADECIMENTOS
Agradeço primeiramente a Deus, por ter nos dado forças para chegar até aqui. Aos nossos familiares e amigos por toda compreensão e paciência, contribuindo diretamente nessa caminhada. A esta Instituição e seu corpo docente, por terem ampliado as portas do conhecimento e nos ensinado o caminho a percorrer neste novo ciclo que se inicia. Aos amigos e colegas de turma que juntamente conosco partilharão desta nova etapa em nossas vidas
“A persistência é o melhor caminho para o êxito. ”
Charles Chaplin
RESUMO
INTRODUÇÃO: A Helicobacter pylori é uma bactéria gram-negativa, espiralada, em forma de bastonete curvos, apresentam de 4 a 6 flagelos unipolares essenciais para a sua mobilidade e para a sua sobrevivência bacteriana ao hostil ambiente estomacal. É considerada uma das bactérias mais patogênicas, infectando 50% da população mundial. OBJETIVO: Realizar uma revisão sistemática de literatura sobre os métodos de diagnósticos para detecção da bactéria Helicobacter pylori e comparar a sensibilidade e especificidade dos testes. METODOLOGIA: Trata-se de estudo de revisão crítica da literatura, com procedimento descritivo e comparativo, utilizando-se como instrumento de coleta de dados a metodologia PRISMA em estudos científicos publicados entre 2010 a 2023 nas plataformas online SCIELO e PUBMED. Utilizou-se os Descritores em Ciêcias da saúde (DeCS): Helicobacter pylori, Neoplasias Gástricas, Câncer e estômago, Diagnostico, diagnósticos invasivos, Diagnósticos não invasisvos. RESULTADOS: Foram selecionado 33 artigos para compor essa revisão sistemática. Os testes para a detecção da bactéria Helicobacter pylori são divididos em dois tipos de testes; os testes invasivos que são procedimentos que, de alguma forma envolvem penetração em um organismo, e tem um custo benefício bem mais caro e um resultado bem especifico para detecção da bactéria, e conta com o exame de histologia que é o único método capaz de mostrar a extensão da infecção e o grau da infecção, tendo uma especificidade e sensibilidade que varia entre 88 a 93%, 98 a 100%, e tem um custo benefício bem mais caro e um resultado bem específico para a detecção da bactéria, além disso, existem os testes não invasivos que são, mais baratos, com rápidos resultados, porém a eficácia dos testes variam entre a sensibilidade e especificidade de cada teste, como por exemplo, o teste respiratório com ureia é considerado um padrão-ouro apresentando uma elevada sensibilidade, precisão e especificidade (acima de 95%). A ausência do diagnostico pode levar para outras patologias mais graves, como câncer gástrico, úlcera poética, câncer no tecido linfoide associado a mucosa. CONCLUSÃO: Os métodos de diagnósticos para detecção da Helicobacter pylori possuem valores de sensibilidade e especificidade que oscilam entre 60 a 100%. Entre os testes, estudos comprovam que o exame histológico é considerado o específico com valores de 98 a 100%, além de detectar a presença da bactéria, é o único capaz de mostra a extensão da infecção e o grau de danos causados pela infecção. Palavras – chave: Helicobacter pylori, Neoplasias Gástricas, Câncer e estômago, diagnóstico, diagnósticos invasivos, diagnósticos não-invasivos, sensibilidade, especificidade.
SUMMARY
INTRODUCTION: Helicobacter pylori is a gram-negative, spiral, curved rod-shaped bacterium, with 4 to 6 unipolar flagella essential for its mobility and bacterial survival in the hostile stomach environment. It is considered one of the most pathogenic bacteria, infecting 50% of the world’s population. OBJECTIVE: To carry out a systematic literature review on diagnostic methods for detecting the bacterium Helicobacter pylori and compare the sensitivity and specificity of the tests. METHODOLOGY: This is a critical literature review study, with a descriptive and comparative procedure, using the PRISMA methodology as a data collection instrument in scientific studies published between 2010 and 2023 on the SCIELO and PUBMED online platforms. The Health Sciences Descriptors (DeCS) were used: Helicobacter pylori, Gastric Neoplasms, Cancer and stomach, Diagnosis, invasive diagnoses, Non-invasive diagnoses. RESULTS: 33 articles were selected to compose this systematic review. Tests for detecting the bacterium Helicobacter pylori are divided into two types of tests; invasive tests, which are procedures that, in some way, involve penetration into an organism, and have a much more expensive cost-benefit ratio and a very specific result for detecting the bacteria, and rely on the histology exam, which is the only method capable of showing the extent of the infection and the degree of infection, having a specificity and sensitivity that varies between 88 to 93%, 98 to 100%, and has a much more expensive cost-benefit and a very specific result for detecting the bacteria, in addition, There are non-invasive tests that are cheaper, with quick results, however the effectiveness of the tests varies between the sensitivity and specificity of each test, for example, the urea breath test is considered a gold standard with high sensitivity, accuracy and specificity (above 95%). Lack of diagnosis can lead to other more serious pathologies, such as gastric cancer, peptic ulcer, cancer of the lymphoid tissue associated with the mucosa. CONCLUSION: Diagnostic methods for detecting Helicobacter pylori have sensitivity and specificity values that range from 60 to 100%. Among the tests, studies prove that the histological examination is considered the specific one with values of 98 to 100%, in addition to detecting the presence of the bacteria, it is the only one capable of showing the extent of the infection and the degree of damage caused by the infection. Keywords: Helicobacter pylori, Gastric Neoplasms, Cancer and stomach, diagnosis, invasive diagnoses, non-invasive diagnoses, sensitivity, specificity.
INTRODUÇÃO
A Helicobacter pylori, trata-se de uma bactéria microaerofílica (microrganismo que se desenvolvem em baixas concentrações de oxigênio) sendo um bacilo gram-negativo, em forma de espiral ou curvo móvel, flagelado, podendo apresentar de 4 a 6 flagelos unipolares, utilizados para a sua locomoção e motilidade através da mucosa gástrica. Possui uma morfologia homogênea, muitas vezes apresentando em sua estrutura na forma encurvada ou espiralada, tendo a sua superfície lisa com extremidades arredondadas (MATSUMOTO et al, 2019).
Desde sua descoberta por Marshall e Warren em 1983, a Helicobacter pylori (HP) se tornou alvo de incontáveis estudos clínicos, resultando em um curto período de tempo em avanços na prática médica diária de clínicos e gastroenterologistas, sendo considerada uma das descobertas mais importantes da especialidade no último século (SILVA et al, 2021).
A bactéria H. pylori é frequentemente adquirida na infância, podendo persistir no organismo do indivíduo por toda a vida. A gastrite é uma consequência presente em quase todos os infectados pela H. pylori. Entre os sintomas descritos estão a dor e queimação no estômago, dor de cabeça e diarreia, apesar de muitos hospedeiros permanecerem assintomáticos. A capacidade de sobrevivência da H. pylori no ambiente ácido do estômago é decorrente da excreção de amônia bacteriana que neutraliza parcialmente a acidez estomacal, a tolerância da H. pylori ao ácido depende em grande parte da urease, uma enzima citoplasmática. O acesso da uréia à enzima é restringido pela presença de um H+ poro fechado (UreI) tal que em condições ácidas, a ureia pode entrar no espaço citoplasmático e ser hidrolisada em CO2 e amônia (GRAHAM E MIFTAHUSSURUR, 2018).
A H pylori é considerada uma das bactérias mais patogênicas, infectando 50% da população mundial. (MIFTAHUSSURUR;YAMAOKA, 2016).
É frequentemente isoladas de fezes, vômitos, saliva e placa dentária de pacientes infectados, sugerindo vias gastro-oral e/ou fecal-oral como possíveis vias de transmissão. A prevalência de infecções por H. pylori está fortemente correlacionada com as condições socioeconômicas da população, fatores como a alta densidade de habitantes no lar e a falta de água corrente (BARBOSA JA, SCHINONNI MI- 2011).
Para diagnosticar a infecção por H. pylori são utilizadas técnicas com aparatos especializados para detecção da bactéria. Tais técnicas são divididas em invasivas e não invasivas. A escolha da mais adequada dependerá do estado e da sintomatologia do paciente (MOHAMMADIAN; GANJI, 2019).
Dessa forma o objetivo deste trabalho foi realizar uma revisão de literatura sobre os métodos de diagnósticos clínicos laboratoriais, invasivos e não invasivos para a detecção da bactéria Helicobacter pylori, e comparar a sensibilidade e especificidade dos teste, além de descrever os riscos associados a falta de diagnóstico da Helicobacter pylori.
METODOLOGIA
Trata-se de um estudo de revisão crítica da literatura, com procedimento descritivo e comparativo, utilizando como fonte de dados a bibliografia sobre Helicobacter pylori, onde discorre-se sobre os metodos de diagnostico para a detecção da bacteria e comparar a sensibilidade e especificidade dos testes invasivos e não invasivos.
Utilizou-se os Descritores em Ciêcias da saúde (DeCS): Helicobacter pylori, Neoplasias Gástricas, Câncer e estômago, diagnóstico, diagnósticos invasivos, diagnósticos não-invasivos,
sensibilidade, especificidade, nas plataformas on line Scielo e Pubmed.
Para a seleção dos artigos, estudos de casos, artigo de revisão, pesquisas cientificas e teses utilizou-se a metodologia PRISMA (Preferred Reporting Items for Systematic Reviews and Meta-Analyses)
Analisaram-se trabalhos entre os anos de 2013 a 2023, compreendendo um periodo de dez anos, de forma a abranger investigações atuais.
Foram excluídos dessa revisão bibliográfica, artigos fora do periodo proposto de dez anos, fora do tema ou objetivo e com idioma não desejado, publicados em mais de uma base de dados e que não apresentem metodologia clara e resultados compatíveis.
Da mesma forma, foram descartados estudos publicados anteriores a 2013 e que cujo a temática não envolva os testes que são feitos para o diagnostico da Helicobacter pylori.
RESULTADO E DISCUSSÃO
Após a busca, foi elaborado o fluxograma da seleção de artigos conforme mostrado abaixo.
Figura 1 – Fluxograma de seleção de artigos – Fonte: Autores.
A seguir, demostramos na tabela 1 (um), o resumo das principais informações dos artigos selecionados de acordo com a busca nos bancos de dados.
| Autor/Ano | Tipo de Estudo | Título | Objetivo | Resultados |
| MIFTAHUSSURUR; YAMAOKA, 2015 | Pesquisa Científica | Métodos de diagnóstico da infecção por Helicobacter pylori para estudos epidemiológicos importância crítica da validação de testes indiretos. | Acompanhar metaplasia intestinal causada por infecção persistente por H. pylori | Métodos de diagnóstico direto, IHC (teste direto de histopatologia e/ou imuno-histoquímica), RUT (teste rápido de urease e cultura) são frequentemente usados, pois fornecem informações sobre genótipo e resistência a antibióticos. Entre o testes indiretos, UBT (teste respiratorio de ureia) e SAT (teste de antígeno fecal) tornaram-se os melhores métodos para determinar uma infecção ativa. A H. pylori pode ser distribuído de forma desigual no estômago e a metaplasia intestinal pode resultar em um falso negativo nas amostras antrais. |
| KAYALI et al, 2018 | Artigo de Revisão | Testes não invasivos para diagnósticodo Helicobacter pylori estado da arte. | Avaliar o desempenho de testes sorológicos quantitativos comercialmente disponíveis em ensaios e encontrar uma sensibilidade e especificidade e o desempenho dos testes qualitativos. | O teste de antígeno fecal usando anticorpos monoclonais é um teste não invasivo eficiente para o diagnóstico de infecção por Helicobacter pylori, com a sua Sensibilidade de 99% e a Especificidade de 82% |
| GRAHAM; MIFTAHUSSURUR, 2018 | Revisão Sistemática | Urease por Helicobacter pylori para diagnóstico de infecção por Helicobacter pylori: Uma mini revisão | Avaliar o desenpenho da ureia, para diagnosticar a deteccao no estômago, mostrando que era possível neutralizar secreção e curar uma úlcera duodenal administrando uréia por via oral e parenteralmente para humanos. | A urease de H. pylori agora é usada como biomarcador para a infecção e uma variedade de técnicas têm foi desenvolvido para detectar com segurança sua presença e, assim, diagnosticar a infecção. na tentativa de encontrar inibidores de urease para usar para incapacitar o organismo e o auxílio no tratamento. |
| MOHAMMADIAN; GANJI, 2019 | Artigo de Revisão | Os testes de diagnóstico para detecção da infecção por Helicobacter pylori. | Revisar os métodos atuais que são utilizados para a detecção de Infecção por H. pylori entre pessoas. | Os testes sorológicos são mas apropriados para estudos de triagem devido à sua reprodutibilidade, facilidade de uso, menor custo e disponibilidade, porém,o diagnóstico mais confiável pode ser alcançado por uma combinação de dois ou mais testes na prática clínica de rotina. |
| GU, 2017 | Artigo de Revisão | Papel dos Flagelos na Patogênese do Helicobacter pylori. | Investigar o papel flagelos de Helicobacter pylori sobre a patogenicidade desta Bactéria em humanos. | Os flagelos da Helicobacter pylori produzem diferentes tipos de motilidade, incluindo ‘motilidade de natação, espalhamento motilidade e motilidade de enxame, que são definidas como movimento em meio líquido, movimento em ágar mole (0,3%) e movimento na superfície de meios semissólidos ou sólidos, respectivamente. |
| TOUATI et al, 2017 | Artigo de Revisão | Epidemiologia, Diagnóstico e Fatores de Risco da infecção por Helicobacter pylori | Revisar sobre a epidemiologia da infecção por H. pylori, o diagnóstico e fatores de risco críticos responsáveis por sua alta prevalência em algumas populações e áreas geográficas. | O testes invasivos são utilizados na prática clínica e o não invasivos principalmente em epidemiologia e para avaliar o resultado de um tratamento de erradicação. Isto é necessário ter pelo menos dois testes concordantes para confirmar ou negar uma infecção na prática clínica. O principal os fatores de risco permanecem associados às condições de vida socioeconómicas, familiares e aos fatores ambientais. Esses dados destacam a importância da identificação de fatores de risco específicos da população como reservatório de H. pylori que permitirá desenvolver medidas preventivas eficientes estratégias para limitar a prevalência de H. Pylori infecção entre as populações mais vulneráveis. |
| KAMBOJ et al, 2017 | Artigo de Revisão | Helicobacter pylori: o passado, o presente e o futuro na gestão | Abordagem epidemiologia, patogênese e o diagnóstico para a detecção da H.pylori | Nos países em desenvolvimento, a infecção comumente se desenvolve em crianças e a infecção crônica continua na idade adulta, os fatores de risco para transmissão estão relacionados condições de vida que promovam a proximidade contato pessoal, como casas lotadas e compartilhamento de leitos. A Infecção por Helicobacter pylori desencadeia intensa liberação de células fagocíticas que vai em busca tentativa de matar o organismo liberando metabólitos de oxigênio. A infecção por Helicobacter pylori pode ser diagnosticado usando métodos não invasivos e invasivos métodos. Em geral, tanto os métodos não invasivos quanto os |
| ANSARI and YAMAOKA, 2017 | Artigo de Revisão | Sobrevivência do Helicobacter pylori em território ácido gástrico | Resumir as diversas características funcionais e aspectos moleculares pelos quais a bactéria pode combater e sobreviver à acidez gástrica pH para estabelecer as infecções persistentes | O estudo conclui que o H. Pylori está bem habituado ao seu nicho ecológico de acidez gástrica em pH abaixo para causar infecções persistentes. O mecanismo de adaptação de bactéria aos efeitos adversos do pH ácido é um mecanismo complexo envolvendo vários fatores, como fatores bacterianos (proteínas, enzimas, forma e flagelos) e fatores ambientais (uréia, muco e ácido). No entanto, o mecanismo exato de vários fatores envolvidos na produção de ácido tolerância ainda permanece sem solução e exige um estudo extensivo para avaliar o papel exato na sobrevivência do ácido. |
| LOPES et al, 2014 | Artigo de Revisão | Infecção por Helicobacter pylori, desenvolvimentos recentes em diagnóstico | Descrever avanços mais recentes em métodos de diagnóstico baseados em biópsia e não-biópsia para infecção por H. pylori | A capacidade de detectar anticorpos H. Pylori na saliva é menor do que na sorologia baseada no sangue. Contudo, o uso de técnicas moleculares para a detecção da infecção por H. pylori na saliva ou na placa dentária pode tornam esses espécimes atraentes porque são mais fáceis de coletar. Métodos de diagnóstico baseados em biópsia e não-biópsia para infecção por H. pylori contribui ainda mais para melhorar a abordagem clínica atual e manejo de doenças associadas ao H. Pylori. A contribuição específica de cada método para a evolução estratégias e algoritmos para avaliação e gestão da infecção por H. pylori (testar e tratar) continuará a ser de extrema relevância. |
| SÁNCHEZ et al, 2015 | Artigo de Revisão | Concordancia entre procedimentos diagnósticos invasivos para infecção por helicobacter pylori em adultos | Comparar a concordância dos teste invasivos para diagnostico de infecção de helicorbacter pylori em adultos, de um hospital regional do instituto de segurança e serviços sociais dos trabalhadores do Estado; no México. | Achados histopatológicos em estudos histológicos positivos para infecção por H. pylori foram gastrite crônica em 60/70 (85,7%), gastrite crônica com metaplasia em 6/70 (8,6%), gastrite atrófica em 2/70 (2,9%) e gastrite crônica com metaplasia e displasia em 2/70 (2,9%) (p=0,000).Achados histopatológicos no teste rápido dos urease positivos foram gastrite crônica em 42/50 (84%), gastrite crônica com metaplasia em 4/50 (8%), gastrite atrófica em 2/40 (4%), gastrite crônica com metaplasiae displasia em 1/50 (2%) e inflamação mínima da mucosa gástrica em 1/50 (2%) (p=0,000). O conhecimento da concordância entre estudos invasivos na prática clínica, neste estudo, o acordo entre cultura e histologia foram boas (K= 0,729); entre ele cultura e teste rápido de urease foram aceitáveis. |
| DE PARDO GHETTI, 2013 | Revisão Sistemática | Helicobacter pylori: um problema atual | Observar os conceitos conhecidos sobre a patogênese e apresentação clínica da infecção por Helicobacter em crianças. | Foi realizado um estudo em recém nascidos, com acompanhamento por 24 meses, detectaram que ocorreu uma taxa de aquisição de 20%, muitos ficaram negativos, ou seja, a infecção não persistiu. Portanto, reforça-se o caráter transitório da HP, que deve ser levado em consideração quando se considera uma intervenção terapêutica nesta faixa etária. A infecção contraída em idade precoce pode regredir espontaneamente, onde a amamentação provavelmente desempenha um papel fundamental, pode ficar assintomático durante muitos anos ou pode manifestar-se na idade adulta com dispepsia, gastrite ou outros sintomas. Nas crianças, esta infecção bacteriana causará uma diminuição na defesa natural do sistema imunológico, que são os sucos gástricos, permitindo a entrada de patógenos como vírus, bactérias como Salmonella, parasitas como Giardia lamblia. |
| ATKINSON et al, 2015 | Artigo de revisão | Infecção por Helicobacter pylori: Estratégias de Diagnóstico primário e pós-terapia | Descreve sobre os novos desenvolvimentos e os principais parâmetros de cada teste, como seleção cuidadosa da modalidade de teste dentro do contexto clínico é necessária para o manejo adequado de pacientes sintomáticos infectados. | Foi feito a seleção do teste mais adequado para diagnosticar a infecção por H. pylori que depende do quadro clínico do paciente, em relação ao custo-eficácia, como também a probabilidade de resultados de testes positivos. Fezes monoclonais, antígeno 95% sensibilidade/especificidade. Sorologia IgG 75–85% e 79–90% variação entre sensibilidade e especificidade e identifica virulência e fatores. Endoscópico Histologia 88–93% boa sensibilidade e especificidade, Imuno-histoquímica 97% e 100% excelente sensibilidade teste rápido de urease 80–95% e 97–99% Requer alta carga bacteriana. Cultura 60% e 100% Sensibilidade aos antibióticos disponibilidade limitada, lenta, tecnicamente Desafiante. PCR 100% boa Sensibilidade/Especificidade. . |
| NORA et al, 2016 | Artigo de revisão | O teste imunocromatográfico de antígeno fecal é eficaz para o diagnóstico primário de infecção por Helicobacter pylori em pacientes dispépticos | Determinar o desempenho diagnóstico do teste de antígeno fecal na identificação da infecção por H. pylori | Foram estudados 163 pacientes, 51% do sexo masculino, com idade média de 56 e 85 anos. A infecção por H. pylori estava presente em 49%. Teste fecal apresentou: sensibilidade 67,5%; especificidade 85,5%; valor preditivo positivo 81,8% e valor preditivo negativo 73,2%; A razão de verossimilhança positiva foi de 4,7 e Razão de Verossimilhança Negativa 0,4. A razão de chances de prevalência para teste positivo foi de 12,3. |
| JAVED et al, 2019 | Artigo de revisão | Impacto da virulência do Helicobacter pylori Fatores na resposta imunológica do hospedeiro e Patologia Gástrica | Revisar sobre entendimento atual do cag ilha de patogenicidade (cagPAI), a citotoxina vacuolizante (VacA) e uma grande família de proteínas de membrana externa (OMPs), que estão entre as proteínas de H. pylori mais bem compreendidas determinantes de virulência que contribuem para a doença. | Estudos observacionais em humanos e experimentais em camundongos gnotobióticos, demonstraram que a microbiota comensal pode afetar o desenvolvimento de H. pylori associado a câncer gastrico, incluindo infecção crônica pelo vírus Epstein-Barr. A solução para este dilema é ter o cagPAI, que promove a inflamação, mas também ter numerosos mecanismos redundantes para controlá-la, como a VacA. |
| CHEN et al, 2019 | Artigo de revisão | A Associação entre Infecção por Helicobacter pylori e Hemoglobina A glicada no diabetes: uma meta-análise | Foi conduzida uma meta-análise da literatura sobre a infecção por H. pylori que pode ou não aumentar o nível da hemoglobina A glicosilada em pacientes com diagnostico de diabetes. | Estudos com participantes com diabetes foram incluídos na metanálise, (95%) os níveis de hemoglobina A (6,5) foram elevados em pacientes com infecção por Helicobacter pylori em comparação com pacientes sem Helicobacter (72%); A análise de sensibilidade (87%) mostrou que os resultados eram confiáveis e nenhuma evidência de viés de publicação substancial foi detectada. |
A H. pylori dispõe de um mecanismo que a difere das outras bactérias. Possui a capacidade de neutralizar a defesa do epitélio da mucosa gástrica, através da produção de uma substância chamada hipocloridria, comprometendo assim a barreira ácida do estômago, tornando-a suscetível também a outros patógenos (DE PARDO GHETTI, 2013).
Os mecanismos de motilidade da bactéria desempenham um papel de grande interesse para estudiosos. A atuação dos flagelos da bactéria influência nos tipos de motilidade que irão realizar no trajeto pela mucosa gastrointestinal. Os tipos de motilidades são: motilidade de enxame, motilidade disseminada e motilidade de natação (TOUATI et al, 2017).
A motilidade de enxame caracteriza-se pela movimentação da bactéria em meio sólido e semissólido. A motilidade disseminada envolve a movimentação realizada em meio ágar mole (concentrações em 0,3%). Seguindo da motilidade de natação onde a movimentação é realizada em meio líquido (GU, 2017).
A viabilidade do H. pylori depende muito dos seus fatores de colonização, tais como a quimiotaxia, urease e proteína da membrana externa, com isso, o ambiente ácido do estômago não é adequado para o seu crescimento devido o pH ser levemente alcalino, estudos indicam que a urease tem um papel protetor na bactéria, podendo facilitar a sua colonização (ALFAROUK et al., 2019).
DIAGNÓSTICOS PARA DETECÇÃO DA H. PYLORI
Existem vários métodos que são utilizados para a detecção do H. pylori, todos eles podem ser úteis para o diagnóstico, no entanto, eles se diferenciam por sua sensibilidade e especificidade. Os testes utilizados são: os invasivos e os não invasivos.
Assim, como qualquer outro agente patogênico, é essencial que haja a escolha correta dos testes, para que não ocorra erros na seleção do diagnóstico correto, tendo em vista que todos possuem suas vantagens e desvantagens (BESSÈDE et al., 2017)
TESTES DE DIAGNÓSTICO INVASIVOS (DIRETO)
Os testes invasivos, normalmente são os mais utilizados para a detecção da bactéria e são realizados através da coleta da biópsia da mucosa gástrica. Os testes são: exame histológico (EH); teste rápido da urease (RUT); cultura e reação em cadeia da polimerase (PCR) (TOUATI et al, 2017).
Exame Endoscópico
O exame de endoscopia é a uma investigação usada em primeira instância para pacientes com dispepsia e que também pode diagnosticar úlcera péptica, doenças malignas gástricas e as infecções por H. pylori. Usa-se a biópsia e outros testes, tais como, o teste da urease (RUT) e histologia e cultura para concluir as suspeitas relacionadas a clínica do indivíduo (MOHAMMADIAN; GANJI, 2019).
Por ser um exame de alto custo, causar desconforto, exigir a necessidade de encaminhamento e acompanhamento médico, ele possui um rendimento elevado para diagnosticar, pois mostra as áreas afetadas pelo patógeno usando a biópsia para aprofundar-se na infecção. A endoscopia é usada como padrão-ouro, dentre os métodos invasivos. A grande desvantagem deste exame é o incomodo e desconforto que causa ao paciente (BESSÈDE et al., 2017).
Por meio do exame endoscópico é possível identificar a presença da infecção pela bactéria (Figura 2), principalmente com os avanços tecnológicos e o surgimento de novos aparelhos com alta definição, filtros de luz e magnificação de imagens, podendo proporcionar melhor visualização da área afetada, proporcionando uma melhor visualização para realizar a biopsia (ISHIKURA et al., 2019).
Figura 2 – Imagem de Endoscopia digestiva gástrica, mostrando a área contaminada pelo H.pylori.
Fonte:https://caddrzardo.com.br/artigos/detalhes/12/diagnostico-da-infeccao- por-helicobacter-pylori
Exame Histológico (EH)
O exame histológico foi o teste elaborado para ser o padrão-ouro para o diagnóstico da infecção por H. pylori. Para a realização do teste são utilizadas várias substâncias de coloração, como: corante de prata, Giemsa, Dieterle, Gimenez, laranja de acridina, hematoxilina, eosina, McMullen e imunomarcação. O uso de técnicas especiais de coloração como Giemsa e prata ou ainda, a realização de imuno-histoquímica elevam a sensibilidade do teste (KAMBOJ et al 2017)
A avaliação histológica e bem detalhada da biópsia será bem-sucedida quando realizada em múltiplos locais, principalmente, dentro do antro e do corpo, elevando os índices de detecção da bactéria. A realização do exame histológico depende de uma boa execução da biópsia do local (SÁNCHEZ et al., 2015).
O teste histológico é o único método capaz de mostrar a extensão da infecção como também o grau de dano obtido na mucosa gástrica, este método é o único capaz de detectar as lesões associadas a infecção. A sensibilidade e especificidade do teste foram descritas como 88 a 93%, 98 a 100%, respectivamente. Os cortes histológicos estão voltados para mostrar a área infectada, sendo necessário que seja feita uma boa biópsia do local (Figura 3) na imagem é possível verificar a colonização da bactéria no decorrer da mucosa gástrica (ANSARI; YAMAOKA, 2017).
Figura 3 – Lâmina histológica da biopsia, mostrando a bactéria adentrando as células da mucosa gástrica.
Fonte: https://bmd-biomedicina3l.blogspot.com/2010/04/helicobacter.html
Os resultados falsos-negativos no exame histológico estão vinculados especificamente quando as amostras de biópsia foram realizadas em caso de sangramento (úlceras pépticas) (KAYALI et al., 2018). Os sangramentos específicos causados pelas ulcerações atrapalham a realização das técnicas, nestes casos é indicado que seja sanado este problema para dá continuidade a investigação. Ainda podemos considerar a histologia da infecção um dos melhores métodos a serem utilizados, em comparação aos demais existentes(LOPES et al, 2014)
Teste Rápido da Urease (RUT)
A atividade do H. pylori no ambiente ácido é totalmente dependente da produção da enzima citoplasmática chamada urease, que torna a bactéria tolerante ao pH estomacal(GRAHAM;MIFTAHUSSURUR, 2018).
Desta forma a urease produzida permite a permeabilidade sendo ativado pelo pH ácido facilitando sua estabilidade e maior proliferação pela ao longo da mucosa (GRAHAM; MIFTAHUSSURUR, 2018).
Devido à grande produção da enzima urease pelo H. pylori é realizado o teste rápido da urease (RUT). O RUT é indicado para detectar a produção da enzima por se tratar de um teste de baixo custo comercial, tempo de execução reduzido, apresentar sensibilidade e especificidade (acima de 90%) compatíveis com as condições clínicas normais, se comparados aos métodos de histologia e cultura (BLANCHARD; CZINN, 2017).
Cultura
O método de cultura da H. pylori é feita através da biópsia gástrica, retirando um pedaço de tecido lesionado. Este não é um método que é usado como rotina, apenas em laboratórios especializados devem realizar o teste. É um dos métodos menos acurados, com sensibilidade variante de 60 a 80%. Este método é realizado também para pesquisas científicas, a realização do teste é cara e demorada, embora isso, a sensibilidade é precisa para o diagnóstico, a cultura da bactéria também permite o isolamento para estudos fenotípicos e genotípicos, é necessário um meio de cultura específico e condições microaeróbicas para o crescimento da bactéria e uma incubação por 5-7 dias a 37ºC (ALLAHVERDIYEV et al., 2015).
A H. pylori pode crescer em condições de oxigênio atmosférico com 10% de CO2, sugerindo que a bactéria pode ser um aeróbio capnofilico (microorganismos com crescimento ótimo em altas concentrações de dióxido de carbono).
Os meios de cultura utilizados para o cultivo da bactéria incluem: ágar Skirrow, ágar Brucella, ágar de sangue Columbia, infusão de cérebro e coração ou ágar de soja Tripticase, suplementado com sangue de ovelha ou cavalo (Figura 4) (WANG et al., 2015).
Figura 4 – Terceiro dia de cultivo de Helicobacter pylori em Agar sangue.
Fonte: https://microbiologynotes.com/cultural-characteristics-of-helicobacter-pylori/
Reação em cadeia de polimerase (PCR)
De acordo com (EMBUTNIEKS, 2018), os métodos moleculares são considerados métodos de alta sensibilidade e especificidade. O diagnóstico por PCR tem se mostrado um teste confiável, principalmente se for realizado a partir do suco gástrico. Dispõe também de outras variantes importantes, como verificar a resistência do patógeno aos antibióticos e modificações genéticas (polimorfismos) causadas no hospedeiro.
A realização da PCR para diagnosticar a infecção por H. pylori, parte principalmente do uso de espécimes variáveis de amostras biológicas, sendo os principais: saliva, fezes, suco gástrico e a biópsia gástrica. Em casos graves onde o paciente já apresenta sangramentos o uso da PCR mostra índices superiores a 95%, para sensibilidade e especificidade, se comparados a outros testes convencionais (PATEL et al., 2014).
Segundo Ianonne et al. (IANNONE et al., 2018), comumente o diagnóstico para detecção da H. pylori feito através do uso de testes moleculares, como a PCR, é utilizado somente para desfechos de pesquisas. Uma das maiores vantagens da aplicabilidade deste teste em amostras de biópsia gástrica é a identificação de mutações no material genético (DNA bacteriano), se elas estiverem vinculadas à resistência a tratamentos à base de antibióticos.
TESTES DE DIAGNOSTICOS NÃO INVASIVOS (INDIRETOS)
Os testes indiretos ou não invasivos estão tornando-se os preferíveis para a detecção da presença da bactéria na mucosa gástrica, uma vez que eles podem apresentar resultados simples, de baixo custo e mais rápidos. Eles são: teste respiratório com ureia, teste de antígenos nas fezes e sorologia (JAVED et al, 2019).
Teste respiratório com ureia
O teste respiratório com ureia é considerado um padrão-ouro apresentando uma elevada sensibilidade, precisão e especificidade (acima de 95%), por se tratar de um teste comum e de monitoração da resposta com relação aos antimicrobianos. O teste detecta indiretamente a infecção pela bactéria no estômago, mensurando a atividade da enzima urease (ATKINSON, 2016).
Para realizar este teste é necessário que o paciente esteja em jejum de no mínimo 6 horas, colhe-se uma amostra de ar expirado. Logo após, é administrado o suco de fruta com a ureia marcada. Em seguida, passados os 30 minutos é colhida uma nova amostragem de ar. Lê-se o conteúdo em espectrofotômetro de luz infravermelha, para considerar os resultados positivos é aceitável porcentagens acima de 4% (HOOI et al., 2017).
Teste de antígeno nas fezes
O teste de antígenos fecais (FAT), têm como objetivo identificar antígenos do H. pylori, presentes na amostra fecal, usando tanto anticorpos monoclonais como também os policlonais. Existem duas maneiras de executar o FAT, através de ensaios imunocromatográficos e imunoenzimáticos. Os custos envolvidos neste teste podem estar associados ao nível econômico dos países, em tese, vale mais apena usar os testes por imunocromatografia, devido a rapidez da execução do procedimento e o baixo custo do material (NORA et al., 2016).
A utilização do teste antígeno monoclonal realizado em fezes tem uma alta precisão, porém sua baixa aceitabilidade em relação a alguns contextos precisa de validação local. Uma técnica especialmente desenvolvida identificou o gene da subunidade bacteriana do RNA ribossômico 23s sendo o marcador para o diagnóstico da infecção usando os testes moleculares na amostra de fezes, apresentando os resultados em 99% de especificidade e 82% de sensibilidade (CHEN et al., 2019).
Na figura 5, pode-se visualizar a janela de resultados, onde contém a linha de controle do teste, utilizada para demonstrar a funcionalidade do teste. Os resultados revelam-se em negativo, expresso somente por uma linha vermelha (controle) e positivo apresentando-se em duas linhas vermelhas, demonstrando a presença de antígenos para a bactéria (SKREBINSKA et al., 2018)
Figura 5 – Teste rápifo para detecção de antigenos nas fezes
Fonte: https://endoscopiaterapeutica.com.br/author/sergiomarques/?print=print-search
Sorologia para detecção de Helicobacter pylori
Dos métodos não invasivos descritos na literatura, a técnica que é bastante utilizada atualmente é o imunoensaio, que é utilizada na detecção no soro de anticorpos IgG especificos. Esse método tem uma vantagem muito importante de não ser afetado com o uso de medicamentos, o que não deixa de tornar este método confiável em relação ao controle de tratamento O ponto negativo é que em relação a validação do método no meio populacional existe uma queda nos resultados de especificidade (de 83 para 44,4%) e a sensibilidade (de 70,6 para 90,9%), reduzindo a acurácia do teste (TOUATI et al., 2017).
Os testes sorológicos baseiam-se na detecção de anticorpos anti- H. pylori a partir de: soro, urina ou saliva. Entres os diversos testes sorológicos para pesquisa de anticorpos existentes, destacam-se: ELISA, imunoensaios enzimáticos (EIA), imunoblotting e teste de anticorpos IgG, sendo o mais confiável a pesquisa de IgG (LUIS et al., 2011).
Em relação a capacidade do teste em detectar infecções ativas da bactéria, depende muito da idade que cada paciente apresenta como também a escolha do antigeno que é usado na preparação de anticorpos no kit ELISA e condições da infecção (HASOSAH 2018)
RISCOS ASSOCIADOS A FALTA DE DIAGNOSTICO DA Helicobacter pylori
A infecção por H. pylori pode-se manifestar de forma assintomática; nessa situação, não é possível determinar a presença da bactéria com base em sintomas ou achados clínicos. Nesse sentido, é importante uma ferramenta com alta sensibilidade que permita a detecção da bactéria em indivíduos assintomáticos. Os resultados clínicos da infecção podem ser graves ou não graves e serão determinados de acordo com a relação do parasita-hospedeiro incluindo a gastrite crônica e o câncer gástrico, A falta de diagnóstico e tratamento pode permitir que a bactéria persista no estômago, aumentando o risco de câncer ao longo do tempo. Obter um diagnóstico preciso da infecção por H. pylori é o primeiro passo crucial para o sucesso do tratamento (MIFTAHUSSURUR; YAMAOKA, 2016).
A ausência de diagnóstico da infecção por H. pylori representa uma preocupação substancial, uma vez que essa bactéria afeta cerca da metade da população global A ausência de um diagnóstico preciso e de tratamento adequado pode acarretar uma série de complicações gastrointestinais que vão para além das úlceras estomacais (MIFTAHUSSURUR; YAMAOKA, 2016).
A inflamação, muitas vezes chamada de gastrite crônica ativa, é a marca registrada da infecção por Helicobacter pylori, ocorrendo uniformemente em todos aqueles que estão infectados. Na maioria dos casos, isso é assintomático e assim permanece durante toda a vida do hospedeiro. No entanto, cerca de 10% das pessoas infectadas desenvolverão úlcera péptica, e 3% progredirão para câncer gástrico (GC), que é a segunda causa mais comum de morte por câncer em todo o mundo (LOPES et al 2014)
A Helicobacter pylori é uma bactéria que afeta aproximadamente metade da população global. A falta de diagnóstico adequado pode resultar em uma série de problemas estomacais, incluindo úlcera péptica, adenocarcinoma gástrico, linfoma gástrico e outras complicações gastrointestinais. Um diagnóstico primário, preciso e confiável é bastante importante para o controle do tratamento e da infecção, para que não ocasione outras patologias. Com isso, a conscientização e a busca por cuidados médicos são cruciais para lidar com os desafios que a infecção pela bactéria pode apresentar, garantindo uma melhor qualidade de vida e bem-estar geral. (LOPES et al 2014)
É fundamental que qualquer indivíduo que suspeite de uma infecção por H. pylori ou esteja lidando com sintomas gastrointestinais persistentes consulte um profissional de saúde e siga o tratamento recomendado, a fim de prevenir potenciais complicações de longo prazo. A falta de diagnóstico e tratamento da infecção por Helicobacter pylori pode levar a uma série de complicações graves. Sendo assim indispensável a orientação médica para diagnóstico.
CONCLUSÕES
Os métodos de diagnósticos para detecção da Helicobacter pylori possuem valores de sensibilidade e especificidade que oscilam entre 60 a 100%. Entre os testes, estudos comprovam que o exame histológico é considerado o específico com valores de 98 a 100%, além de detectar a presença da bactéria, é o único capaz de mostra a extensão da infecção e o grau de danos causados pela infecção. Também podemos citar o teste respiratório com ureia que possui valores acima de 95% para sensibilidade e especificidade, uma vez que o mesmo serve para a detecção da bactéria, mesmo que indiretamente, como também para monitoramento das respostas aos antimicrobianos. Vale ressaltar que a clínica do paciente é de total relevância para a escolha dos testes a serem realizados, tendo em vista que, o quanto antes houver o diagnóstico precoce, o tratamento diminuirá as possibilidades de evolução para um câncer gástrico, por exemplo.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
.
ALFAROUK, K. O. et al. The Possible Role of Helicobacter pylori in Gastric Cancer and Its Management. Frontiers in Oncology, v. 9, n. February, 2019.
ALLAHVERDIYEV, A. M. et al. Isolation and diagnosis of Helicobacter pylori by a new method: Microcapillary culture. World Journal of Gastroenterology, v. 21, n. 9, p. 2622–2628, 2015.
ANSARI, S.; YAMAOKA, Y. Survival of Helicobacter pylori in gastric acidic territory. Helicobacter, v. 22, n. 4, p. 1–13, 2017.
ATKINSON, N. S. S.; BRADEN, B. Helicobacter Pylori Infection: Diagnostic Strategies in Primary Diagnosis and After Therapy. Digestive Diseases and Sciences, v. 61, n. 1, p. 19–24, 2016.
BARBOSA JA, SCHINONNI MI- 2011. Genes de virulência em Helicobacter pylori: componentes estruturais e métodos de detecção. SAÚDE & CIÊNCIA EM AÇÃO – Revista Acadêmica do Instituto de Ciências da Saúde
BESSÈDE, E. et al. Diagnosis of Helicobacter pylori infection. Helicobacter, v. 22, p. e12404, 2017.
BLANCHARD, T. G.; CZINN, S. J. Identification of Helicobacter pylori and the evolution of an efficacious childhood vaccine to protect against gastritis and peptic ulcer disease. Pediatric Research, v. 81, n. 1–2, p. 170–176, 2017.
CHEN, L. et al. Ultrasensitive detection of H. pylori in human beings feces based on Immunomagnetic Beads
capture and fluorescent quantum dots. The Analyst, 2019.
COELHO, ZATERKA, 2005. II Consenso Brasileiro sobre Helicobacter pylori. SciELO – Scientific Electronic Library Online, 2005.
DALLA NORA, M. et al. Is the
Immunocromatographic Fecal Antigen Test Effective for Primary Diagnosis of Helicobacter Pylori Infection in Dyspeptic Patients? Arquivos de gastroenterologia, v. 53, n. 4, p. 224–227, 2016.
DE PARDO GHETTI, E. M. Helicobacter Pylori: un problema actual. Gaceta Médica Boliviana, v. 36, n. 2, p. 108–111, 2013.
EMBUTNIEKS, D. S. B. I. N. V. S. V. K. Y. V. Diagnosis of Helicobacter pylori infection in clinical practice. Aeklinn, p. 133–139, 2018.
GRAHAM, D. Y.; MIFTAHUSSURUR, M. Helicobacter pylori urease for diagnosis of Helicobacter pylori infection: A mini review. Journal of Advanced Research, v. 13, p. 51–57, 2018.
GU, H. Role of Flagella in the Pathogenesis of Helicobacter pylori. Current Microbiology, v. 74, n. 7, p. 863–869, 2017
HASOSAH, M. Supernatants Upregulate the Serotonin Transporter Expression in Intestinal Epithelial Cells. p. 59–66, 2018.
HOOI, J. K. Y. et al. Global Prevalence of Helicobacter pylori Infection: Systematic Review and Meta-Analysis. Gastroenterology, v. 153, n. 2, p. 420–429, 2017.
IANNONE, A. et al. New fecal test for non-invasive Helicobacter pylori detection: A diagnostic accuracy study. World Journal of Gastroenterology, v. 24, n. 27, p. 3021–3029, 2018.
ISHIKURA, N. et al. Helicobacter pylori ( HP ) infection alone , but not HP -induced atrophic gastritis , increases the risk of gastric lymphoma : a case-control study in Japan. 2019.
JAVED, S.; SKOOG, E. C.; SOLNICK, J. V. Impact of Helicobacter pylori Virulence Factors on the Host Immune Response and Gastric Pathology. [s.l: s.n.].
KAMBOJ, A. K.; COTTER, T. G.; OXENTENKO, A. S. Helicobacter pylori: The Past, Present, and Future in Management. Mayo Clinic Proceedings, v. 92, n. 4, p. 599–604, 2017.
KAYALI, S. et al. Non-invasive tests for the diagnosis of helicobacter pylori: state of the art. Acta bio-medica : Atenei Parmensis, v. 89, n. 8- S, p. 58–64, 2018.
LOPES, A. I.; VALE, F. F.; OLEASTRO, M. Helicobacter pylori infection – Recent developments in diagnosis. World Journal of Gastroenterology, v. 20, n. 28, p. 9299–9313, 2014.
LUÍS, J. et al. Dialnet-HelicobacterPyloriRevisionDeLosAspectosFisiologico-4054204. 2011.
MIFTAHUSSURUR; YAMAOKA, 2016. Diagnostic Methods of Helicobacter pylori Infection for Epidemiological Studies: Critical Importance of Indirect Test Validation. Hindawi Publishing Corporation BioMed Research International Volume 2016, Article ID 4819423, 14 pages.
MOHAMMADIAN, T.; GANJI, L. The Diagnostic Tests for Detection of Helicobacter pylori Infection . Monoclonal Antibodies in Immunodiagnosis and Immunotherapy, v. XX, n. Xx, p. 1–7, 2019
MOHAMMADIAN; GANJI, 2019. Os testes de diagnóstico para detecção de infecção por Helicobacter pylori. MONOCLONAL ANTIBODIES IN IMMUNODIAGNOSIS AND IMMUNOTHERAPY Volume XX, Number XX, 2019
PATEL, S. K. et al. Diagnosis of Helicobacter pylori: What should be the gold standard? World Journal of Gastroenterology, v. 20, n. 36, p. 12847–12859, 2014.
PÉREZ-PÉREZ; BLASER, 2010. Helicobacter pylori: Associação com o câncer gástrico e novas descobertas sobre os fatores de virulência. Revista de Ciências Médicas e Biológicas 2010.
SÁNCHEZ, J. et al. Concordancia entre procedimientos diagn??sticos invasivos para la infecci??n por Helicobacter pylori en adultos. Salud Publica de Mexico, v. 57, n. 4, p. 352–357, 2015.
SKREBINSKA, S. et al. Accuracy of two plasma antibody tests and faecal antigen test for non-invasive detection of H. pylori in middle-aged Caucasian general population sample. Scandinavian Journal of Gastroenterology, v. 53, n. 7, p. 777–783, 2018.
TEIXEIRA et al., 2017; CAMILO et al., 2017. Helicobacter pylori e seus aspectos clínicos-epidemiológicos. Brazilian Journal of Development ISSN: 2525-8761.
TOUATI., K. K. P. B. E. Epidemiology, Diagnosis, and Risk Factors of Helicobacter pylori Infection in Children. Euroasian Journal of Hepato-Gastroenterology, v. 7, n. 1, p. 34–39, 2017.
WANG, Y. K. et al. Diagnosis of helicobacter pylori infection: Current options and developments. World Journal of Gastroenterology, v. 21, n. 40, p. 11221–11235, 2015.
Figura 02 – Imagem de Endoscopia digestiva gástrica, mostrando a área contaminada pelo H.pylori. Disponível em:Fonte:https://caddrzardo.com.br/artigos/detalhes/12/diagnostico-da-infeccao- por-helicobacter-pylori, visto por último em: 29/09/2023.
Figura 03 – Lâmina histológica da biopsia, mostrando a bactéria adentrando as células da mucosa gástrica. Disponível em: https://bmd-biomedicina3l.blogspot.com/2010/04/helicobacter.html, visto por último em: 05/10/2023.
Figura 04 – Terceiro dia de cultivo de Helicobacter pylori em Agar sangue. Disponível em: https://microbiologynotes.com/cultural-characteristics-of-helicobacter-pylori/
Figura 05 – Teste rápifo para detecção de antigenos nas fezes.Disponível em: https://endoscopiaterapeutica.com.br/author/sergiomarques/?print=printsearc
Projeto apresentado ao Centro Universitário FAMETRO para obten-ção do título de Bacharel em Farmácia, sob a orientação da Profª. MSc. Anne Cristine Gomes de Almeida.
1Graduandos do Curso de Farmácia do Centro Universitário Fametro.
2Docente do curso de Farmácia, professora mestre.
3Doutora em Doenças Tropicais e Infecciosas (UEA), professora orientadora (FAMETRO). Manaus – AM