ASSOCIATION OF THE ILE118 GENE MUTATION WITH LETHAL WHITE FOAL SYNDROME
ASOCIACIÓN DE LA MUTACIÓN DEL GEN ILE118 CON EL SÍNDROME DEL POTRO BLANCO LETAL
REGISTRO DOI: 10.69849/revistaft/ra10202409181246
Laís Vidal de Assis Pinheiro1
Rhenyer Rangel Dias2
Ricardo dos Santos Alcantara3
Tatiana Alves de Nazareth4
Tatiane Vital Seixas Mello5
Matheus Victor Ramos da Silva6
Vivian da Silva Souza Martins7
Orientadora: Alana Camargo Poncio8
RESUMO: A raça Paint Horse é conhecida por sua pelagem distinta e padrões brancos variados, características que são resultado de uma complexa interação genética. Entre as mutações genéticas que afetam essa raça, a mutação no gene Ile118, responsável pela alteração no receptor de endotelina B (EDNRB), é de particular interesse devido à sua associação com a síndrome do potro branco letal (LPWS). Esta condição, fatal em potros, está relacionada a uma ausência congênita de gânglios nervosos no intestino. Diante do exposto objetiva-se analisar a relevância dessa mutação genética na pelagem do Paint Horse, destacando a importância da detecção precoce através do teste de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), um método amplamente utilizado para identificar mutações genéticas específicas. A metodologia baseia-se na utilização de artigos científicos disponíveis em plataforma de pesquisa acadêmica, abordando tanto a genética da pelagem quanto às implicações clínicas da mutação no gene Ile118. Os resultados desta revisão apontam para a necessidade de um maior entendimento da genética envolvida, com ênfase na aplicação do teste de PCR para a prevenção e manejo da síndrome do potro branco letal. A conclusão sublinha a importância de estratégias de criação informadas por diagnósticos moleculares precisos, a fim de mitigar os impactos desta mutação na população de Paint Horses.
PALAVRAS-CHAVE: gene Ile118, paint horse, mutação, síndrome do potro branco letal.
ABSTRACT: The Paint Horse breed is known for its distinct coat and varied white patterns, characteristics that result from a complex genetic interaction. Among the genetic mutations affecting this breed, the mutation in the Ile118 gene, responsible for the alteration in the endothelin B receptor (EDNRB), is of particular interest due to its association with lethal white foal syndrome (LWFS). This condition, fatal in foals, is related to a congenital absence of nerve ganglia in the intestine. In light of the above, the objective is to analyze the relevance of this genetic mutation in the Paint Horse’s coat, highlighting the importance of early detection through the Polymerase Chain Reaction (PCR) test, a widely used method for identifying specific genetic mutations. The methodology is based on the use of scientific articles available on academic research platforms, addressing both coat genetics and the clinical implications of the Ile118 gene mutation. The results of this review point to the need for a greater understanding of the involved genetics, with an emphasis on the application of PCR testing for the prevention and management of lethal white foal syndrome. The conclusion underscores the importance of breeding strategies informed by precise molecular diagnostics to mitigate the impacts of this mutation on the Paint Horse population.
KEYWORDS: ile118 gene, Paint Horse, mutation, lethal white foal syndrome.
RESUMEN: La raza Paint Horse es conocida por su pelaje distintivo y patrones blancos variados, características que son el resultado de una compleja interacción genética. Entre las mutaciones genéticas que afectan a esta raza, la mutación en el gen Ile118, responsable de la alteración en el receptor de endotelina B (EDNRB), es de particular interés debido a su asociación con el síndrome del potro blanco letal (SPBL). Esta condición, fatal en los potros, está relacionada con una ausencia congénita de ganglios nerviosos en el intestino. En vista de lo expuesto, el objetivo es analizar la relevancia de esta mutación genética en el pelaje del Paint Horse, destacando la importancia de la detección temprana mediante la prueba de Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR), un método ampliamente utilizado para identificar mutaciones genéticas específicas. La metodología se basa en el uso de artículos científicos disponibles en plataformas de investigación académica, abordando tanto la genética del pelaje como las implicaciones clínicas de la mutación en el gen Ile118. Los resultados de esta revisión apuntan a la necesidad de una mayor comprensión de la genética involucrada, con énfasis en la aplicación de la prueba de PCR para la prevención y el manejo del síndrome del potro blanco letal. La conclusión subraya la importancia de las estrategias de cría informadas por diagnósticos moleculares precisos, a fin de mitigar los impactos de esta mutación en la población de Paint Horses.
PALABRAS CLAVE: gen Ile118, paint horse, mutación, síndrome del potro blanco letal.
1. Introdução
A diversidade genética em equinos, especialmente no que tange à pelagem, tem sido objeto de grande interesse tanto para criadores quanto para pesquisadores no campo da biologia do desenvolvimento e das doenças genéticas. Entre as condições mais estudadas, destaca-se a LPWS, uma anomalia congênita comum entre os cavalos da raça American Paint Horse, que serve como modelo para a Doença de Hirschsprung em humanos. Essa síndrome é resultante de uma mutação genética que interfere na migração ou sobrevivência das células da crista neural durante o desenvolvimento embrionário, levando à ausência de melanócitos na pele e a anormalidades no trato gastrointestinal. Potros afetados pela LPWS nascem com pelagem totalmente ou quase totalmente branca e desenvolvem sintomas graves de obstrução intestinal nas primeiras 24 horas de vida, culminando em morte rápida (McCabe et al., 1990).
A associação entre padrões de pelagem e a síndrome é particularmente evidente no subtipo frame overo, um dos padrões registrados pela American Paint Horse Association. Cavalos com esse padrão são os mais propensos a produzir potros afetados pela LPWS. A ausência dos plexos submucoso e mioentérico no trato gastrointestinal desses potros resulta em uma inervação inadequada, que é fatal. A detecção precoce de potros com essa síndrome é crucial, mas ainda mais importante é a prevenção por meio da identificação dos portadores da mutação responsável, uma vez que a condição é letal e não responde a intervenções cirúrgicas (Metallinos et al., 1998).
No contexto da biologia molecular, a mutação específica no gene EDNRB, que causa a substituição do aminoácido isoleucina por lisina na posição 118 (Ile118), é um foco central para a pesquisa. Essa mutação afeta diretamente a função do receptor de endotelina B, essencial para o desenvolvimento normal das células da crista neural. A PCR surge como uma técnica indispensável para a genotipagem, permitindo a detecção precisa dos alelos Ile118 e Lys118. A utilização de primers específicos permite a amplificação seletiva desses alelos, com os produtos sendo diferenciados por eletroforese em gel, possibilitando assim a identificação de portadores e a prevenção de novos casos de LPWS (Santschi et al., 1998).
O presente estudo tem como objetivo analisar a relação entre a mutação Ile118 e o padrão de pelagem frame overo, avaliar a eficácia do teste de PCR na detecção da mutação Ile118 em cavalos Paint Horse, e contribuir para a compreensão dos mecanismos genéticos subjacentes à LPWS, propondo estratégias para a prevenção dessa síndrome através de práticas de manejo reprodutivo baseadas em genotipagem.
2.1 Tipos de Pelagem
2.1.1 Pelagem Overo
A pelagem Overo, também conhecida como “Oveira” ou “Frame Overo”, é distintamente marcada por áreas de despigmentação com contornos irregulares que não cruzam a região dorsal do equino. Essa característica é visível em diversas combinações de cores de fundo, onde as áreas despigmentadas se infiltram na pelagem de base de forma difusa, sem a delimitação clara que se observa em outros padrões de pelagem, como o pampa. A maioria dos cavalos com essa pelagem apresenta a região da cabeça amplamente despigmentada, com pelo menos um membro torácico ou pélvico também afetado (Santos, et al., 2021).
Geneticamente, a pelagem Overo está associada ao locus O no gene EDNRB, onde uma mutação específica pode influenciar as populações de células-tronco dos melanócitos, responsáveis pela pigmentação da pele e pelos. O alelo responsável por essa pelagem, quando em heterozigose, resulta no padrão de pelagem Overo. No entanto, quando em homozigose, essa mutação leva a uma condição conhecida como Aganglionose Ileocólica, uma forma letal de Hirschsprung-like disease, que resulta na LPWS (Rezende e Costa, 2012; Metallinos et al., 1998).
O padrão da pelagem Overo não é claramente definido, o que pode se dever à existência de diferentes padrões genéticos registrados sob o mesmo nome. Por exemplo, um dos padrões de Overo, conhecido como “Frame Overo”, é caracterizado por marcas brancas irregulares e predominantemente localizadas nas partes laterais e ventrais do corpo. Outros padrões incluem marcas que cobrem todas as quatro pernas e a cabeça, mas com pouca ou nenhuma marcação lateral. A dificuldade em distinguir esses padrões apenas pelo fenótipo fez com que fossem agrupados na mesma categoria, apesar das variações genéticas subjacentes (Metallinos et al., 1998).
Além disso, a associação da pelagem Overo com a LPWS é particularmente significativa. O gene EDNRB, quando mutado, interfere na função normal das células da crista neural, que são essenciais para a formação dos gânglios intestinais e da pigmentação. A ausência desses gânglios leva à obstrução intestinal, uma condição fatal nos potros homozigotos para essa mutação (Metallinos et al., 1998).
2.1.2 Pelagem Tobiano
A pelagem Tobiano, conhecida popularmente no Brasil como “Pampa”, é caracterizada por malhas brancas despigmentadas, bem delimitadas, que podem ocorrer sobre qualquer outra pelagem de fundo. Essas malhas são regulares e, em muitos casos, cruzam a linha dorsal do cavalo, uma característica que distingue essa pelagem de outras, como a Overo. A nomenclatura da pelagem Tobiano precede o nome da pelagem de fundo quando a proporção de malhas brancas é maior, como em “pampa de preto” ou “pampa de alazão”. Quando as malhas brancas estão em menor proporção, o termo “pampa” é utilizado após o nome da pelagem, como em “preto de pampa” (Rezende; Costa, 2012).
Geneticamente, a pelagem Tobiano é expressa pelo gene TO, que é dominante sobre o alelo selvagem. A presença desse gene resulta em uma alta probabilidade de que o fenótipo Tobiano se manifeste. O gene KIT, localizado próximo ao gene TO, é implicado na expressão dessa pelagem, que remonta a mais de 3000 anos na Europa Oriental. Cavalos que possuem o alelo TO frequentemente exibem grandes áreas despigmentadas, com bordas lisas, que se estendem ao longo do corpo e das pernas, enquanto a cauda geralmente apresenta uma coloração mista, um fenômeno único associado a essa mutação genética (McFadden et al., 2024; Coelho; Oliveira, 2008).
Os padrões de pelagem Tobiano variam amplamente, desde o “Tobiano clássico”, que apresenta grandes manchas brancas com bordas claras, até o “Tobiano mínimo” e “Tobiano críptico”. Enquanto o Tobiano clássico é facilmente reconhecível por suas grandes manchas e quatro pernas brancas abaixo dos joelhos, o Tobiano mínimo exibe uma distribuição menor das manchas brancas, e o Tobiano críptico pode ser confundido com cavalos sólidos, exceto por pequenas marcas como meias brancas. Essas variações fenotípicas refletem a complexidade da herança genética do padrão Tobiano e a possibilidade de efeitos aditivos quando combinado com outros padrões de manchas brancas (McFadden et al., 2024).
A pelagem Tobiano não apenas possui um valor estético significativo na criação de cavalos, mas também é um marcador importante para a seleção genética. A presença do alelo TO pode ser identificada através de testes de marcadores genéticos, o que permite aos criadores selecionar cavalos que exibem o padrão desejado. Cavalos que carregam o alelo em homozigose podem apresentar manchas adicionais, conhecidas como “ink spots”, que são pequenas manchas escuras dentro das áreas brancas, uma característica que ainda não é completamente explicada apenas pela presença do alelo Tobiano (McCabe et al., 1990; McFadden et al., 2024).
2.1.3 Pelagem Tovero
A distinção do padrão Tovero torna-se desafiadora, especialmente devido à sobreposição de características com outros padrões de pelagem. Estudos apontam que o padrão Tovero pode ser associado ao padrão Overo e Tobiano, o que sugere uma expressão de genes dominantes envolvidos na formação dessas marcas. Esse fenômeno ocorre em várias raças, incluindo Paint Horse, Quarto de Milha e Cavalo Miniatura Americano (Coelho; Oliveira, 2008).
Além disso, a literatura indica que a classificação de cavalos como Tovero envolve a presença de características tanto do padrão Tobiano quanto do Overo, sendo o último mais evidente na cabeça, mas também podendo se manifestar por marcas irregulares no corpo. Isso reflete uma combinação de padrões, tornando o Tovero uma expressão fenotípica única e muitas vezes difícil de categorizar precisamente (Santschi et al., 2001).
A relevância dessa análise é destacada pela complexidade genética e pela diversidade fenotípica que esses cavalos apresentam. O padrão Tovero, portanto, não é apenas uma manifestação estética, mas também um exemplo de como a interação de múltiplos genes pode produzir uma gama diversificada de características dentro de uma população equina (Magdesian et al., 2009).
2.2 Estudos Genéticos
A genética é um ramo da ciência que estuda a natureza do gene e os mecanismos de herança biológica, segundo Bitner-Mathé, Matta e Moreno (2010). A genética é uma área do conhecimento recente, de acordo com Snustad e Simmonsk (2024). Seus princípios fundamentais foram criados inicialmente por Gregor Mendel em meados do século XIX. Os seguintes trabalhos, feitos por pesquisadores, demonstraram que os genes estão situados nos cromossomos e que as gerações mutantes podem ser utilizadas para mapeá-los cromossomicamente. A aceitação de que o genoma contém a informação genética, o descobrimento da estrutura do ácido desoxirribonucleico (DNA) e o esclarecimento do mecanismo de expressão gênica formam a base da genética molecular. O uso da tecnologia do DNA recombinante, que permitiu aos pesquisadores o preparo de grandes quantidades de segmentos de DNA, modernizou a genética, apresentando a base para novos campos (Klug et al., 2010).
Com os avanços na genética equina, estimulados pelo sequenciamento completo do genoma dos equinos, inovaram o estudo de doenças e características equinas (Finno; Bannasch, 2014). Desde o começo dos anos 1990, o sequenciamento de DNA tem sido usado para identificar as causas genéticas de diversas condições hereditárias em equinos. Porém, antes da montagem do genoma de referência, os estudos se baseavam em informações genômicas de outras espécies, o que já permitiu avanços significativos. Algumas referências notáveis incluem a identificação de uma mutação responsável pela paralisia periódica hipercalêmica em cavalos Quarto de Milha e a síndrome letal do overo branco em cavalos American Paint (Petersen; Coleman, 2020).
2.3 Síndromes
A LPWS é uma condição hereditária grave que afeta potros nascidos de cavalos da raça American Paint Horse, especialmente aqueles com linhagem de pelagem overo. Essa síndrome é caracterizada pela aganglionose intestinal, uma ausência congênita de gânglios nervosos no trato gastrointestinal, resultando em uma obstrução funcional fatal. Potros afetados pela LPWS geralmente nascem com uma pelagem branca ou quase totalmente branca e aparentam estar normais à primeira vista, exceto pela coloração. No entanto, dentro de 24 horas após o nascimento, esses animais começam a apresentar distensão abdominal severa e sinais de dor, devido à incapacidade de mover o conteúdo intestinal. Essas complicações rapidamente levam à morte do potro, tornando essa condição uma preocupação significativa na criação de cavalos da raça Paint Horse (Santschi et al., 1998).
A base genética da LPWS está associada a uma mutação no gene que codifica o EDNRB, especificamente a mutação Ile118. Essa mutação é comum em cavalos que apresentam o padrão de pelagem frame overo, um dos vários padrões de pelagem vistos na raça Paint Horse. A mutação no gene EDNRB resulta na produção de um receptor defeituoso, que compromete o desenvolvimento adequado do sistema nervoso entérico. Potros homozigotos para essa mutação, ou seja, que herdaram duas cópias do gene alterado, são inevitavelmente afetados pela LPWS e não sobrevivem por mais de alguns dias após o nascimento (Santschi et al., 2001).
A LPWS em equinos é frequentemente comparada à Doença de Hirschsprung em humanos, devido à similaridade na ausência de gânglios submucosos e mioentéricos no trato gastrointestinal. A detecção da mutação Ile118 no gene EDNRB é essencial para o manejo genético adequado dos programas de criação, visando minimizar a ocorrência dessa síndrome letal. Os avanços na genotipagem, especialmente através do teste de PCR, permitem a identificação precoce de animais portadores, possibilitando a tomada de decisões informadas sobre os cruzamentos e a preservação da saúde dos potros (Metallinos et al., 1998).
2.4 Mutação Genética
A pelagem dos equinos da raça Paint Horse é fortemente influenciada por uma série de genes responsáveis por diferentes padrões de manchas, sendo os genes da série O (Overo) um dos mais estudados. O gene O, em sua forma heterozigota dominante, resulta em cavalos com pelagem Overo, caracterizada por áreas brancas de contorno irregular que não cruzam a linha dorsal do animal. Essa característica é visualmente distinta da pelagem Pampa, associada ao gene P, que produz grandes manchas brancas despigmentadas devido à ausência de melanina em certas áreas do corpo (Rezende; Costa, 2012).
A mutação do gene Ile118 no EDNRB é uma alteração crítica que provoca a LPWS, particularmente em animais homozigotos para o gene Overo. Nessa condição, os potros nascem completamente brancos, com olhos azulados, e apresentam aganglionose ileocólica, uma constrição intestinal fatal que impede a eliminação das fezes, levando à morte em até três dias após o nascimento (Rezende e Costa, 2012). Estudos sugerem que o gene LPWS é alelo ao gene do spotting Overo, e que a ocorrência de potros com LPWS é mais comum em cruzamentos entre dois cavalos Overo, refletindo a herança autossômica recessiva dessa condição (McCabe et al., 1990).
Essa mutação demonstra a complexidade genética envolvida na criação e seleção de equinos da raça Paint Horse. Embora a aparência estética seja um fator importante na seleção desses animais, a compreensão dos riscos genéticos associados, como a probabilidade de gerar potros com a LPWS, é essencial para a saúde e o bem-estar dos animais (Rezende; Costa, 2012; McCabe et al., 1990).
O gene EDNRB é responsável por codificar o receptor de endotelina B, um receptor acoplado à proteína G que desempenha um papel crucial no desenvolvimento de células derivadas da crista neural, como melanócitos e neurônios entéricos. A mutação no alelo Ile118, que resulta na substituição da isoleucina por lisina na posição 118, altera significativamente a estrutura e função desse receptor, resultando em efeitos deletérios observados em potros com LPWS (Santschi et al., 1998).
A LPWS é uma condição caracterizada por uma pelagem predominantemente branca e aganglionose intestinal, uma ausência de neurônios entéricos que causa obstrução intestinal fatal em potros recém-nascidos. Estudos mostram que a mutação Ile118Lys no gene EDNRB é a principal responsável por essa condição, com todos os potros afetados sendo homozigotos para essa mutação. A análise de pedigrees de cavalos Paint revelou que os pais de potros afetados são heterozigotos, carregando uma cópia do alelo mutante, o que evidencia o padrão de herança autossômica recessiva dessa doença (Yang et al., 1998).
A substituição de isoleucina, um resíduo apolar, por lisina, que possui carga positiva, na região transmembrana do receptor EDNRB, sugere que essa alteração pode ter consequências significativas para a conformação e funcionalidade da proteína. Tal mudança na estrutura do receptor pode comprometer a sinalização celular crucial para o desenvolvimento normal dos melanócitos e dos neurônios entéricos, levando aos efeitos pleiotrópicos observados na LPWS, como a aganglionose e a ausência de pigmentação, características dessa síndrome (Santschi et al., 1998).
A LPWS tem sido comparada a doenças humanas, como a Doença de Hirschsprung, e a condições similares em modelos animais, como os camundongos piebald-lethal e os ratos spotting lethal. Essas condições compartilham características clínicas e genéticas, incluindo a mutação no gene EDNRB ou em seus ligantes, que resultam em defeitos no desenvolvimento da crista neural. A semelhança dos padrões fenotípicos entre esses modelos e a LPWS sugere um papel conservado do EDNRB no desenvolvimento de melanócitos e neurônios entéricos, reforçando a relevância dos estudos sobre a mutação Ile118Lys em equinos (Metallinos et al., 1998).
A frequência do alelo mutante Ile118Lys na população de cavalos Paint é significativa, especialmente entre aqueles com a pelagem overo. No entanto, nem todos os cavalos que possuem essa mutação apresentam o fenótipo frame overo, o que indica que a mutação pode não ser completamente penetrante em indivíduos heterozigotos e pode ser modulada por outros genes modificadores. Essa observação sugere a existência de uma complexa interação genética na expressão fenotípica da mutação, que ainda precisa ser explorada em estudos futuros (Bellone, 2010).
O entendimento das implicações da mutação Ile118Lys é vital para os criadores de Paint Horse, pois permite um manejo genético mais informado para evitar a produção de potros afetados pela LPWS. O conhecimento da frequência do alelo na população e das possíveis interações genéticas subjacentes oferece uma base sólida para a seleção de reprodutores, com o objetivo de reduzir a incidência dessa condição letal. A literatura disponível até o momento destaca a necessidade de mais pesquisas para elucidar completamente os mecanismos moleculares envolvidos e para melhorar as práticas de criação baseadas em informações genéticas (Tryon et al., 2009).
2.5 Análise Molecular Reação em Cadeia da Polimerase
O PCR em tempo real é uma técnica molecular utilizada para detectar e quantificar DNA em tempo real, sendo muito útil na identificação de doenças genéticas em potros com LPWS. É uma condição genética ligada à mutação do gene EDNRB, que afeta principalmente cavalos da raça Paint, resultando em potros com pelagem branca e problemas graves no sistema digestivo (Navarro et al., 2015).
Potros homozigotos para o gene dominante são totalmente ou quase totalmente brancos devido à ausência de melanócitos na pele. Estes potros são surdos e apresentam olhos azuis. Apresentam dificuldade de passar alimento através do trato intestinal, devido à deficiência das células nervosas que controlam a ação dos músculos peristálticos. Como resultado, o mecônio não passa pelo trato intestinal, levando ao bloqueio intestinal crônico. Tem-se tentado intervenções cirúrgicas sem sucesso e, deste modo, a condição é letal em todos os casos, daí a importância da identificação dos indivíduos heterozigotos (Silva Bastos et al., 2017).
Apesar de sua importância, a citogenética clássica é pouco utilizada na área de produção animal. No entanto, somando-se a ela novas técnicas como hibridização in situ, uso de marcadores fluorescentes e alguns procedimentos usados na biologia molecular, como, por exemplo, a PCR, tornou-se possível o conhecimento dos genomas animais, identificando-se assim indivíduos portadores ou afetados por mutações genéticas indesejáveis. Isso auxilia nos programas de melhoramento genético, evitando o nascimento de potros defeituosos e/ou mortos, o que representa uma perda econômica e emocional aos criadores (Coelho; Oliveira, 2008).
Para realizar o teste PCR em tempo real, é necessário fazer a coleta de amostra; normalmente, é coletado sangue ou tecido para extração de DNA. Após isso, é realizado o isolamento do DNA, utilizando kits específicos ou reagentes para lise celular e purificação do DNA. Um mix é preparado contendo Primers específicos que flanqueiam a região mutante do gene EDNRB, sondas marcadas com fluoróforos que se ligam especificamente à sequência alvo, polimerase Taq com atividade de exonuclease, dNTPs e tampão apropriado, além do DNA extraído da amostra (Haas; Torres, 2016).
A PCR em tempo real (RT-PCR) é um método semi-quantitativo (qPCR), muito sensível e permite obter resultados em curto período de tempo. A tecnologia está distribuída mundialmente, suprindo a necessidade na área médica de se ter um teste diagnóstico eficiente e rápido. Atualmente, existem protocolos e kits comerciais para identificar uma grande quantidade de patógenos com importância médica. A tecnologia permite a detecção direta dos produtos da PCR durante a fase exponencial da reação, combinando amplificação e detecção em um só passo (Haas; Torres, 2016).
A RT-PCR requer uma plataforma de instrumentação que contém um termociclador acoplado a um sistema óptico para excitação e captura da emissão da fluorescência, além de um computador para aquisição de resultados e análise final da reação. Várias tecnologias de RT-PCR estão disponíveis no mercado (Haas; Torres, 2016).
A técnica RT-PCR é baseada em duas descobertas importantes: a primeira é a atividade exonuclease 5’-3’ da enzima Taq DNA polimerase, e a segunda é a construção de sondas de oligonucleotídeos duplamente marcadas. As sondas emitem sinal de fluorescência somente quando clivadas (Haas; Torres, 2016).
A RT-PCR gera um ciclo limiar (Cycle Threshold – CT) ou ponto de passagem para cada amostra. Este é o ponto em que o produto cruza um limite pré-determinado. Quanto maior a quantidade de DNA alvo de partida na reação, mais baixo será o CT, pois serão necessários menos ciclos para que a reação ultrapasse o limiar (Haas; Torres, 2016).
3. CONCLUSÃO
A importância da detecção precoce e da prevenção da LPWS em cavalos da raça Paint Horse, especialmente nos que apresentam o padrão de pelagem frame overo, fortemente associado à mutação Ile118 no gene EDNRB. A análise da relação entre essa mutação e a pelagem frame overo reforça a necessidade de estratégias eficazes de manejo reprodutivo, baseadas em genotipagem, para minimizar a incidência dessa condição letal. O uso da PCR demonstrou ser uma ferramenta eficaz na detecção da mutação Ile118, permitindo identificar portadores heterozigotos e prevenir o nascimento de potros homozigotos afetados pela LPWS.
As descobertas aqui discutidas contribuem para um maior entendimento dos mecanismos genéticos subjacentes à LPWS, ressaltando a relevância de intervenções genéticas preventivas. O avanço contínuo nas tecnologias de biologia molecular e genômica, como o sequenciamento completo do genoma equino, abre novas possibilidades para a pesquisa e o manejo de doenças genéticas hereditárias em equinos, promovendo melhorias significativas na saúde animal e na produção equina. A aplicação prática dos testes de genotipagem no contexto da criação de cavalos Paint Horse pode não apenas evitar perdas econômicas e emocionais, mas também assegurar a manutenção de linhagens genéticas valiosas dentro de padrões éticos e sustentáveis.
REFERÊNCIAS
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1Graduando em Medicina Veterinária
Instituição de formação: Universidade de Vassouras
Endereço: Saquarema, Rio de Janeiro, Brasil
E-mail: contattopinheiro1@gmail.com
2Graduando em Medicina Veterinária
Instituição de formação: Universidade de Vassouras
Endereço: Saquarema, Rio de Janeiro, Brasil
E-mail: rhenyerrangel@gmail.com
3Graduando em Medicina Veterinária
Instituição de formação: Universidade de Vassouras
Endereço: Saquarema, Rio de Janeiro, Brasil
E-mail: Rick_abh@hotmail.com
4Graduando em Medicina Veterinária
Instituição de formação: Universidade de Vassouras
Endereço: Saquarema, Rio de Janeiro, Brasil
E-mail: Tatianaalves959@gmail.com
5Graduando em Medicina Veterinária
Instituição de formação: Universidade de Vassouras
Endereço: Saquarema, Rio de Janeiro, Brasil
E-mail: Tatianemellosacchi@gmail.com
6Graduando em Medicina Veterinária
Instituição de formação: Universidade de Vassouras
Endereço: Saquarema, Rio de Janeiro, Brasil
E-mail: Mtv74173@gmail.com
7Graduando em Medicina Veterinária
Instituição de formação: Universidade de Vassouras
Endereço: Saquarema, Rio de Janeiro, Brasil
E-mail: Viviansaqua@yahoo.com.br
8Mestre em Ciências Veterinárias
Universidade Federal do Espírito Santo
Endereço: Mimoso do Sul, Espírito Santo, Brasil
E-mail: alanacp@id.uff.br